土壤中双氰胺残留量的检测方法

引用本文

盛立彦, 李美华, 吕靖, 孙雯, 潘洁. 土壤中双氰胺残留量的检测方法[J].核农学报, 2017,31(1): 163-168
SHENG Liyan, LI Meihua, LYU Jing, SUN Wen, PAN Jie. A Determination Method of Dicyandiamide Residues in Soil[J].JOURNAL OF NUCLEAR AGRICULTURAL SCIENCES,2017,31(1): 163-168 复制到剪切板

Permissions

《核农学报》编辑部所有

土壤中双氰胺残留量的检测方法

盛立彦^*, 李美华, 吕靖, 孙雯, 潘洁

上海化工研究院,上海 200062

^*通讯作者:同第一作者。

作者简介:盛立彦,男,助理工程师,主要从事各类大型仪器分析研究。E-mail:slysuper@126.com

收稿日期:2015-11-16 接受日期:2016-02-29 网络出版日期:2017-01-10

基金:国家科技支撑计划项目 (2015BAK45B01)

摘要

为检测双氰胺的残留量,在土壤样品加入自制的双氰胺-¹⁵N₄内标,经超声萃取及冷冻离心处理,采用电喷雾(ESI⁺)正离子扫描模式,在选择离子监控模式(SRM)下,建立高效液相色谱-串联质谱法定量分析双氰胺的方法。结果表明,该方法在10~50 μg· L^-1的浓度范围内线性良好,标准曲线回归方程为 y =0.9698 x + 0.0039, r² =0.9994。方法的检出限与定量限分别为5 μg· L^-1和16 μg· L^-1,回收率为97%~104%,RSD<1.2%(n=6)。采用该方法检测3类不同的土壤样品,其结果均与理论预期相符。综上,该方法简便、灵敏、准确,为科学施用含双氰胺氮肥的研究提供了一种表征手段。

关键词: 高效液相色谱-串联质谱法; 双氰胺; 同位素内标; 土壤

文章编号:1000-8551(2017)01-0163-06 DOI:10.11869/j.issn.100-8551.2017.01.0163

A Determination Method of Dicyandiamide Residues in Soil

SHENG Liyan^*, LI Meihua, LYU Jing, SUN Wen, PAN Jie

Shanghai Research Institute of Chemical Industry, Shanghai 200062

Abstract

A high performance liquid chromatography-mass spectrometry (HPLC-MS/MS) method was established for the determination of dicyandiamide in soils with self - prepared dicyandiamide-¹⁵N₄ as internal standard. Soil samples were prepared by ultrasonic solvent extraction and refrigerated centrifugation. The mass spectrometer was operated in the positive mode using SRM. The linear range of the dicyandiamide concentration was obtained from 10 to 50μg· L^-1 with correlation coefficients ( r²) more than 0.999. The limit of detection (LOD) and the limit of quantitation (LOQ) were 5 μg·L^-1 and 16μg·L^-1, respectively. The recoveries were between 97% to 104%, and RSD value less than 1.2% (n=6). The testing results of three kinds of soil samples by this method agreed to their expectation. The method was simple, sensitive and accurate, filling in the gaps in the analytical technics of soil research.

Keyword: HPLC-MS/MS; dicyandiamide; isotopic labeled internal standard; soil

Show Figures

双氰胺是重要的化工原料以及医药和染料的中间体。在牧场草地上喷洒含双氰胺的氮肥, 可以使其牧养的牛羊减少二氧化氮的排放, 也能减少硝酸盐从土壤中渗漏至河水和溪流中, 以免滋生绿藻、破坏生态^{[1, 2, 3, 4, 5, 6]}。此外, 有研究表明, 双氰胺对于施用铵肥所带来的土壤酸化有明显的抑制作用^{[7, 8]}。

自新西兰毒奶粉事件发生后, 双氰胺受到了广泛关注。新西兰政府与国内部分学者指出, 乳品中检出的双氰胺可能并非人为添加, 而是来源于施了含双氰胺氮肥的土壤^{[9, 10]}。同时, 有研究表明, 双氰胺会在土壤中自然降解, 其降解速率与土壤温度有关^[11]。罗涛等^[12]研究发现, 添加外源真菌能加快双氰胺在土壤中降解的速度。由此可见, 若能保证土壤中残留的双氰胺已被降解, 则今后可在氮肥适当掺杂些许双氰胺, 这样既能发挥其在抑制土壤酸化等方面的有利作用, 又不会对农产品产生影响。因此建立一个能准确检测土壤中双氰胺残留量的分析方法至关重要。

虽然目前采用高效液相色谱法以及高效液相色谱-串联质谱法对牛奶^{[13, 14]}、西药^{[15, 16, 17]}、食品^{[18, 19, 20]}、化肥^[21]甚至空气^[22]中双氰胺进行分析检测的研究已很多, 但对于土壤样品中双氰胺残留量的准确测定鲜有涉及。因此亟需建立一种检测土壤中双氰胺含量的分析方法。

本研究采用高效液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, HPLC-MS/MS)技术, 以上海化工研究院自行研制的双氰胺-¹⁵N₄作为同位素内标, 有效避免样品前处理中回收率低及复杂基质对质谱响应的影响, 建立一种前处理简便、分析周期短、结果准确可靠的分析方法, 旨在为土壤中双氰胺残留量的检测提供支撑。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

双氰胺(AR, 德国Dr. Ehrenstorfer公司), 双氰胺-¹⁵N₄(上海化工研究院自制, 纯度> 99%, ¹⁵N atom%> 97%), 乙腈(HPLC, 德国Merck公司), 试验用水为超纯水。

TSQ Quantum Access高效液相色谱-质谱联用仪(美国Thermo公司), CP225D型电子天平(精确至0.1mg, 德国Sartorius公司), KQ-300 VDE型超声波清洗机(昆山市超声波仪器有限公司), Micro-Q超纯水系统(上海宝尔水处理有限公司), CT14RDⅡ 型台式高速冷冻离心机(上海天美生化仪器设备工程有限公司), QL-901型涡旋振荡器(海门市其拉贝尔仪器制造有限公司)

1.2 仪器条件

1.2.1 色谱条件 Venusil-HILIC色谱柱(2.1 mm× 150 mm, 5 μ m); 流动相为乙腈:乙酸铵(1mmol· L^-1, pH 值4.0)=9:1(v/v), 流速为300 μ L· min^-1; 进样量为10 μ L。

1.2.2 质谱条件 ESI源正离子模式, 电喷雾电压:5 000 V, 鞘气压力:15 psi, 辅助气压力:15 psi, 毛细管温度:325 ℃; 扫描模式:SRM, 质谱分析参数见表1, 双氰胺与双氰胺-¹⁵N₄的子离子扫描图见图1。

表1 双氰胺和双氰胺-¹⁵N₄的定性定量离子对及碰撞能量 Table 1 Qualitative and quantitative ion pairs, collision energy of dicyandiamide and dicyandiamide-¹⁵N₄

	Figure Option View Download New Window
	图1 待测化合物质谱图注:a:双氰胺子离子扫描图; b:双氰胺-¹⁵N₄子离子扫描图。Fig.1 Mass spectrum of the analytes Note:a: Product scan of dicyandiamide. b: Product scan of dicyandiamide-¹⁵N₄.

1.3 标准溶液的配制

分别称取双氰胺和双氰胺-¹⁵N₄各10 mg(精确到0.01 mg), 用乙腈水溶液(1:1, v/v)定容至100 mL, 得到浓度为100 mg· L^-1的标准贮备液; 再用乙腈水溶液(1:1, v/v)稀释配制成双氰胺浓度依次为10、15、20、25、30、35、40、45、50 mg· L^-1, 双氰胺-¹⁵N₄浓度都为30 mg· L^-1的标准溶液。

1.4 样品前处理

准确称取0.5 g经过烘干、研碎、过筛后的土样于50 mL烧杯中, 加入双氰胺-¹⁵N₄内标。以10 mL 50%的乙腈水溶液, 在25℃下超声萃取30 min, 移出上清液。萃取3次, 合并液相部分于40 mL具塞离心管中, 以6 000 r· min^-1转速于4℃冷冻离心30 min, 取上清液1.0 mL过0.22 μ m有机相滤膜, 备用。

1.5 样品测定

将处理后的样品在1.2仪器条件下测定, 待测样品中双氰胺与双氰胺-¹⁵N₄定量离子对的响应值应在标准曲线线性范围内, 采用内标法定量; 色谱峰保留时间和定性离子对的相对丰度应与标准物质一致, 用于定性分析。

2 结果与分析

2.1 质谱参数的优化

在试验中固定其他参数不变, 改变其中一种参数, 研究喷雾电压、毛细管温度、鞘气压及辅助气压4种质谱参数对双氰胺电离后离子流强度的影响。其中进样浓度为20 mg· L^-1, 以双氰胺峰面积为考量标准。

由图2可知, 双氰胺峰面积随电压升高而增大; 随毛细管温度升高而增大, 但达到325℃后, 温度带来的影响甚微; 随鞘气压力升高而增大, 但当达到较高鞘气压值时, 上升趋于平缓; 随辅助气压力升高而显著增大。由于鞘气压与辅助气压的提升对响应均有正向的影响, 且两者气源均为高纯氮气, 故两者都取15psi, 以相对最低的成本获得相对最高的响应。综合考虑, 最终选择的最佳质谱参数条件为:喷雾电压5 000 V、鞘气压15 psi、辅助气压15 psi、毛细管温度 350 ℃。

	Figure Option View Download New Window
	图2 质谱参数取不同值时双氰胺的响应Fig.2 Response of dicyandiamide at different mass parameters

2.2 线性关系与检出限

将双氰胺标准品与自制内标双氰胺-¹⁵N₄按1.3配成一系列不同浓度的标准溶液, 采用SRM选择离子监控扫描模式采集信号, 对其进行分析。以目标化合物与内标化合物的质量浓度之比( X )及其峰面积之比( Y )绘制标准曲线, 采用内标法定量。双氰胺含量在10~50 mg· L^-1, 目标化合物与内标化合物的浓度比在0.5~2.0范围内线性关系良好, 回归方程为 y=0.9698 x + 0.0039, n=9, R² =0.9994。检出限(limit of determmation, LOD)(S/N=3)为5 μ g· L^-1, 定量限(limit of quantification, LOQ)(S/N=10)为16 μ g· L^-1。

2.3 回收率与精密度

在3个不同加标水平下, 对空白土壤样品进行加标回收试验, 计算加标平行样(n=6)的回收率和相对标准偏差。由表2可知, 双氰胺回收率在97.1%~103.7%之间, 相对标准偏差为1.0%~1.2%。

表2 土壤样品中的双氰胺加标回收率及相对标准偏差(n=6) Table 2 Recoveries and relative standard deviation of dicyandiamide in soil samples(n=6)/%

2.4 不同土壤中双氰胺残留量的检测结果

土壤样本A采集自上海北横通道施工现场, 为未施用过氮肥的空白土壤; 土壤样本B采集自上海化工研究院普陀院本部花圃, 为施用过不含双氰胺氮肥的对照土壤; 土壤样本C采集自上海化工研究院崇明高效生态农业示范基地, 为施用过人为掺混双氰胺氮肥的试验土壤, 掺入双氰胺量约为800mg· kg^-1土壤。每一种土壤样本均在不同点采集6个样品, 按1.4的方法对样品进行前处理后, 按1.5的方法测定并计算双氰胺残留量。

由表3可知, 空白样本A与对照样本B的检测结果均小于检出限, 与理论相符; 土壤样本C中双氰胺检出量比在氮肥中人为掺杂的双氰胺含量略低, 考虑到浇灌等过程中的损失及其自身部分降解, 试验结果也与理论预期相吻合。同时, 6次平行测定的RSD为4.0%, 表明测定的重复性也能达到要求。

表3 不同土壤中双氰胺残留量的检测结果(n=6) Table 3 Determination results of various soil samples(n=6)

3 讨论

由于双氰胺在水中的溶解性优于乙腈, 因此在前处理方法中, 应采用较低比例的乙腈水溶液对土样进行萃取。但对于HILIC分离而言, 当样品溶液中含有过多的水时, 溶质在固定相的分配就会减弱, 从而使保留变弱, 柱效下降。此外, 由于水相对较高的沸点, 过多的水相也不利于样品溶液在质谱离子源的离子化, 从而降低质谱响应。因此, 本研究在萃取时使用1:1的乙腈水溶液, 避免了吹干后再溶解的操作步骤, 节省了样品制备所需要的时间。超声时间和萃取次数的增加能提高萃取的效果, 虽然采用的同位素内标法并不需要待测组分与内标物被完全提取, 但更高的提取效率能增加质谱响应, 从而减小误差。权衡时间成本和方法的灵敏度、准确度表现后, 本试验最终确定采用萃取3次、每次超声30 min的提取方法。超声萃取后静置分层并不能保证固、液两相完全分离, 为保证萃取效果, 应确保液体完全转移, 由于3次萃取后的液相部分会残留少量固体, 因此合并液需经过冷冻离心进行进一步固液分离, 最后经0.22 μ m的滤膜过滤后进样分析。

本试验的研究对象是组成较为复杂的土壤样品, 虽然目前鲜有关于测定土壤中双氰胺含量方法的报道, 但相比于乳制品、药物、肥料等其它样品基质, 本研究对双氰胺的检出限和回收率指标依然达到了很高的水平。这是因为同位素内标的物理和化学性质与待测物几乎相同, 无需考虑待测物与内标物在前处理中提取效率的差异; 同位素内标的色谱、质谱行为也与待测物更接近, 且采用同位素内标可以避开液质联用法中常见的基质效应干扰。因此, 在液相色谱-质谱联用检测技术中, 采用同位素内标法优势非常明显。有研究表明, 检测乳制品中的双氰胺时, 在与本研究类似的前处理条件下, 采用双氰胺-¹⁵N₄作为内标物能获得较低的检出限及较高的回收率^{[23, 24, 25, 26]}, 本试验结果也印证了这一点。

目前, 稳定同位素技术在农业领域中的应用日益受到重视。在施肥途径及肥效研究中, 同位素示踪技术已经起到了举足轻重的作用^[27]; 同位素内标法在定量分析方面的优势也使稳定同位素标记物有很广阔的市场前景, 但关于其制备技术的研究在国内尚处于起步阶段, 而当前市售的同位素内标试剂仍多为进口商品, 价格昂贵^[28]。本研究采用的双氰胺-¹⁵N₄为上海化工研究院自主研发研制, 成本相对低廉, 且前处理简单高效, 方法的灵敏度与准确性优异, 有望发展成为一种通用的土壤中双氰胺的检测方法。同时, 本试验结果也为研究双氰胺降解规律、科学施用含双氰胺氮肥以及双氰胺在其他农业领域中应用的学者提供了表征手段的支撑。

4 结论

本研究采用双氰胺-¹⁵N₄为内标, 通过高效液相色谱-质谱串联技术建立了土壤样品中双氰胺含量的测定方法, 结果证明, 该方法在测定范围内线性良好, 具有较高的准确性及良好的可重复性, 填补了土壤中双氰胺残留量分析方法的技术空白。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献

View Option

[1]	戴宇, 贺纪正, 沈菊培. 双氰胺在农业生态系统中的应用效果及其影响因素[J]. 应用生态学报, 2014, 25(1): 279-286 [本文引用:1]
[2]	Shepherd M, Welten B, Wyatt J, Balvert S. Precipitation but not soil texture alters effectiveness of dicyand iamide to decrease nitrate leaching from dairy cow urine[J]. Soil Use and Management, 2014, 30(3): 361-371 [本文引用:1]
[3]	Wakelin S, Williams E, O'Sullivan C A, Cameron K C, Di H J, Cave V, O'Callaghan M. Predicting the efficacy of the nitrification inhibitor dicyand iamide in pastoral soils[J]. Plant Soil, 2014, 381(1): 35-43 [本文引用:1]
[4]	巨晓棠, 刘学军, 张福锁. 尿素与DCD和有机物料配施条件下氮素的转化和去向[J]. 中国农业科学, 2002, 35(2): 181-186 [本文引用:1]
[5]	刘倩, 褚贵新, 刘涛, 王健, 冶军, 王飞, 梁永超. DCD在不同质地土壤上的硝化抑制效果和剂量效应研究[J]. 中国生态农业学报, 2011, 19(4): 765-770 [本文引用:1]
[6]	O'Callaghan M, Gerard E M, Carter P E, Lardner R, Sarathchand ra U, Burch G. Ghani A, Bell N. Effect of the nitrification inhibitor dicyand iamide(DCD) on microbial communities in a pasture soil amended with bovine urine[J]. Soil Biology and Biochemistry, 2010, 42(9): 1425-1436 [本文引用:1]
[7]	Jiang J, Xu R K, Qian W, Tong D L. Inhibiting Effect of dicyand iamide on soil acidification induced by application of urea or ammonium bicarbonate[J]. Communications in soil science and plant analysis, 2014, 45(13): 1823-1830 [本文引用:1]
[8]	刘源, 钱薇, 徐仁扣. 双氰胺对施氮肥引起的红壤酸化的抑制作用[J]. 生态与农村环境学报, 2013, 29(1): 76-80 [本文引用:1]
[9]	格物. 新西兰“毒奶粉”真相[J]. 食品与健康, 2013, (3): 18 [本文引用:1]
[10]	杨滨, 李帅. 新西兰双氰胺牛奶带给我们的思考[J]. 乳品与人类, 2013, (2): 22-31 [本文引用:1]
[11]	Kelliher F M, Clough T J, Clark H, Rys G, Sedcole J R. The temperature dependence of dicyand iamide(DCD) degradation in soils: a data synthesis[J]. Soil Biology and Biochemistry, 2008, 40(7): 1878-1882 [本文引用:1]
[12]	罗涛, 王煌平, 张晓玲, 张青, 蔡开地, 翁伯琦. 土壤中双氰胺降解及与降解菌的关系[J]. 农业环境科学学报, 2012, 31(11): 2174-2179 [本文引用:1]
[13]	Zou H, Zhang W, Feng Y, Liang B. Simultaneous determination of melamine and dicyand iamide in milk by UV spectroscopy coupled with chemometrics[J]. Analytical Methods, 2014, 15(6): 5865-5871 [本文引用:1]
[14]	胡雪, 李翠枝, 白艳梅, 段国霞, 赵静, 李慧秀. 超高效液相色谱质谱联用测定饲料、牛乳及乳制品中双氰胺[J]. 乳业科学与技术, 2014, 37(1): 19-22 [本文引用:1]
[15]	马玉荣, 张茹, 秦莉伟. HPLC测定复方盐酸二甲双胍格列苯脲中3种有关物质[J]. 中国药事, 2009, 23(9): 911-913 [本文引用:1]
[16]	余延年. HPLC法测定盐酸二甲双胍肠溶微丸胶囊中双氰胺的含量[J]. 药物分析杂志, 2007, 27(4): 597-598 [本文引用:1]
[17]	吴莉, 石蓓佳, 王玉. HPLC-MS/MS测定盐酸苯乙双胍及片剂中双氰胺的含量[J]. 中国药学杂志, 2010, 45(10): 780-783 [本文引用:1]
[18]	Inoue K, Sakamoto T, Min J Z, Todoroki K, Toyo'oKa T. Determination of dicyand iamide in infant formula by stable isotope dilution hydrophilic interaction liquid chromatography with tand em mass spectrometry[J]. Food Chemistry, 2014, 156(8): 390-393 [本文引用:1]
[19]	Zhang Y, Gong W J, Zhao Y G, Zhou H. Rapid determination of trace dicyand iamide in mussels from Zhejiang coast by ultra-fast liquid chromatography-tand em mass spectrometry with isotope internal stand ard dilution technique[J]. Environmental Science and Pollution Research International, 2014, 21(24): 14219-14225 [本文引用:1]
[20]	王祖翔, 蒋俊, 孙莉, 周洪斌, 赵云霞. 高效液相色谱-串联质谱法测定食品中的尿素、缩二脲与双氰胺[J]. 分析测试学报, 2012, 31(5): 593-599 [本文引用:1]
[21]	程莎, 李建兵, 王晖, 丁明善, 王志存. 高效液相法测定化肥中的双氰胺和三聚氰胺的方法研究[J]. 现代化工, 2014, (3): 166-168 [本文引用:1]
[22]	周长美, 周靖平, 吴健, 李小娟. 高效液相色谱测定工作场所空气中双氰胺方法的验证[J]. 江苏预防医学, 2009, 20(3): 63-64 [本文引用:1]
[23]	陈小珍, 陈万勤, 王瑾, 黄丽英, 张东雷. 高效液相色谱法测定乳制品中的双氰胺[J]. 色谱, 2013, 31(9): 875-877 [本文引用:1]
[24]	黄芳, 马叶芬, 吴惠勤, 黄晓兰, 邓欣, 罗辉泰, 朱志鑫, 林晓珊. 液相色谱-串联质谱法快速测定奶粉中的双氰胺[J]. 分析测试学报, 2013, 32(3): 271-274 [本文引用:1]
[25]	冯峰, 蒋萍萍, 李娜思, 周洪斌, 储晓刚. 超高效液相色谱-质谱法测定乳粉中的双氰胺[J]. 分析化学, 2013, 41(11): 1729-1733 [本文引用:1]
[26]	朱克卫, 周亮, 明红. 高效液相色谱串联质谱法测定奶粉中的双氰胺[J]. 环境化学, 2014, 33(4): 699-700 [本文引用:1]
[27]	黄秀声, 钟珍梅, 黄勤楼, 冯德庆, 陈钟佃, 王明光. 利用¹⁵N示踪技术研究8种禾本科牧草对氮肥的吸收和转化效率[J]. 核农学报, 2014, 28(9): 1677-1684 [本文引用:1]
[28]	杨征敏, 吕龙, 叶庆富. 五种嘧啶苄胺类除草剂氘取代物的合成[J]. 核农学报, 2014, 28(11): 2086-2092 [本文引用:1]

2014

0.0

戴宇, 贺纪正, 沈菊培. 双氰胺在农业生态系统中的应用效果及其影响因素[J]. 应用生态学报, 2014, 25(1): 279-286

The low utilization efficiency of nitrogen fertilizer in agricultural ecosystem has caused serious economic and environmental issues. Dicyandiamide (DCD) is a widely used nitrification inhibitor, which can inhibit nitrification via affecting ammonia oxidizing microorganisms with minimal influence on other soil microorganisms, thereby reducing the leaching of nitrate and emission of greenhouse gases. The factors influencing the efficiency of DCD in soil include soil temperature, pH, texture, organic matter, moisture,  etc . Recently, the application of molecular methods in agricultural systems has shed new light on the microbial mechanism underlying nitrification inhibition by DCD. In this review, the enzymatic inhibition mechanism, the application effects and their influence factors of DCD were summarized, and the prospects of its application were discussed as well.

农业生态系统中较低的氮肥利用率造成了一定的经济损失和环境污染.双氰胺(DCD)是一种高效并且专性抑制土壤硝化活性的化合物，可以通过抑制土壤氨氧化微生物的丰度和活性来显著减少土壤中硝态氮的淋失及温室气体N 2 O的排放，而对其他土壤微生物没有显著影响.影响DCD应用效果的主要因素包括土壤温度、pH值、质地、有机质含量及水分含量等.近些年随着分子生物学技术在农业生态系统中的应用，微生物介导的DCD硝化抑制机理取得了一系列重要研究成果.本文主要对DCD的酶学作用机理、应用效果及其影响因素等方面进行综述，并对今后的研究方向作一展望.

... 在牧场草地上喷洒含双氰胺的氮肥,可以使其牧养的牛羊减少二氧化氮的排放,也能减少硝酸盐从土壤中渗漏至河水和溪流中,以免滋生绿藻、破坏生态^{[1,2,3,4,5,6]} ...

2014

0.0

2014

0.0

2002

0.0

巨晓棠, 刘学军, 张福锁. 尿素与DCD和有机物料配施条件下氮素的转化和去向[J]. 中国农业科学, 2002, 35(2): 181-186

2011

0.0

刘倩, 褚贵新, 刘涛, 王健, 冶军, 王飞, 梁永超. DCD在不同质地土壤上的硝化抑制效果和剂量效应研究[J]. 中国生态农业学报, 2011, 19(4): 765-770

通过硝化抑制剂抑制土壤硝化作用是实现作物铵硝混合营养和提高氮肥利用率的重要途径之一。本试验采用室内模拟的方法,在人工气候室(25℃)黑暗培养条件下,应用新疆石灰性土壤研究了不同剂量的双氰胺(dicyandiamide,DCD)在砂土、壤土、黏土3种不同质地土壤中对土壤硝态氮、铵态氮转化的影响及DCD的剂量效应和硝化抑制效果。处理30 d内,各剂量DCD处理对砂土的硝化抑制率为96.5%～99.4%(平均值为98.3%),在黏土上为66.9%～85.6%(平均值为77.6%),在壤土上为49.3%～79.4%(平均值为67.7%),总体硝化抑制率表现为砂土黏土壤土。在砂土上DCD的剂量效应不明显,DCD用量从纯氮的1.0%增加到7.0%时,土壤中硝态氮含量仅增加1.9～10.7 mg.kg-1(培养30 d时);而在壤土和黏土中,土壤硝态氮含量随DCD浓度的增加而显著下降,存在明显剂量效应。这说明施用DCD可显著抑制新疆石灰性土壤的硝化作用过程,在砂土、壤土、黏土中DCD的最佳浓度分别为纯氮用量的6.0%、7.0%和7.0%,并在培养30 d内发挥显著作用。

2010

0.0

2014

0.0

... 此外,有研究表明,双氰胺对于施用铵肥所带来的土壤酸化有明显的抑制作用^[7,8] ...

2013

0.0

刘源, 钱薇, 徐仁扣. 双氰胺对施氮肥引起的红壤酸化的抑制作用[J]. 生态与农村环境学报, 2013, 29(1): 76-80

Effects of dicyandiamide (DCD) inhibiting nitrification and soil acidification caused by nitrogen fertilizer in two Ultisol samples collected separately from Langxi of Anhui Province and Yingtan of Jiangxi Province were investigated through indoor incubation.Results show that when no nitrogen fertilizer was applied, DCD suppressed nitrification of residual ammonium nitrogen in the soils and subsequent soil acidification,leading to rise in pH by 0.37 and 0.40 in the soils from Langxi and from Yingtan,respectively as compared with the controls at the end of the incubation. When urea or ammonium bicarbonate was added, DCD inhibited nitrification of ammonium released from the nitrogen fertilizers and subsequent soil acidification. In addition to hydrolysis of urea and consumption of protons by the association of bicarbonate ions with H + ,the addition of DCD also offset to a certain extent the effect of the two fertilizers on red soil acidity.At the end of incubation, Treatments urea+DCD and ammonium bicarbonate+DCD was 0.62 and 0.46 higher in pH than their counterparts without DCD in the soil from Langxi, and 0.82 and 0.69 higher in the soil from Yingtan. The treatments with DCD were also significantly lower in content of exchangeable acids than their couterparts without DCD.It is, therefore,concluded that combined application of nitrogen fertilizer and DCD can effectively alleviate red soil acidification caused by nitrogen fertilizers.

通过室内培养试验，研究双氰胺(DCD)对采自安徽郎溪和江西鹰潭2种红壤中硝化反应的抑制作用，以及对氮肥引起的土壤酸化的抑制效果。结果表明，当不添加氮肥时，DCD抑制了土壤残留铵态氮的硝化作用及由此引起的土壤酸化，培养结束时添加DCD处理的安徽郎溪和江西鹰潭红壤pH值分别比不添加DCD处理高0.37和0.40。当添加尿素和碳酸氢铵时，DCD抑制了来自氮肥的铵态氮的硝化作用以及由此引起的土壤酸化；同时由于尿素水解和碳酸氢根与H + 的缔合消耗质子，添加DCD还使2种氮肥对红壤酸度起到一定程度的改良作用。培养结束时，DCD+尿素和DCD+碳酸氢铵处理的安徽郎溪红壤pH值分别比单加尿素和碳酸氢铵处理提高0.62和0.46，江西红壤pH值分别比单加尿素和碳酸氢铵处理提高0.82和0.69。添加DCD处理土壤交换性酸含量也显著低于不加DCD处理。因此，氮肥与DCD配合施用可以有效缓解氮肥引起的红壤酸化。

... 此外,有研究表明,双氰胺对于施用铵肥所带来的土壤酸化有明显的抑制作用^[7,8] ...

2013

0.0

... 新西兰政府与国内部分学者指出,乳品中检出的双氰胺可能并非人为添加,而是来源于施了含双氰胺氮肥的土壤^[9,10] ...

2013

0.0

杨滨, 李帅. 新西兰双氰胺牛奶带给我们的思考[J]. 乳品与人类, 2013, (2): 22-31

摘　要：美国《华尔街日报》1月25日晨报道，享誉全球的新西兰牛奶及奶制品近日被检测出含有低含量的有毒物质双氰胺（编者注：双氰胺为制造三聚氰胺的原料）。报道还称，新西兰乳品业龙头企业、全球最大乳品加工企业和原料供应商恒天然公司早在去年下半年就得知产品中被检出双氰胺。但因股东大会即将召开而选择保密。

... 新西兰政府与国内部分学者指出,乳品中检出的双氰胺可能并非人为添加,而是来源于施了含双氰胺氮肥的土壤^[9,10] ...

2008

0.0

... 同时,有研究表明,双氰胺会在土壤中自然降解,其降解速率与土壤温度有关^[11] ...

2012

0.0

罗涛, 王煌平, 张晓玲, 张青, 蔡开地, 翁伯琦. 土壤中双氰胺降解及与降解菌的关系[J]. 农业环境科学学报, 2012, 31(11): 2174-2179

摘　要：采用灭菌土培、非灭菌土培、田间蔬菜种植、添加外源降解菌土培试验研究了土壤中双氰胺（DCD）降解及与降解菌的关系。结果显示,不论是单施DCD、尿素配施DCD,还是碳酸氢铵配施DCD的土壤,灭菌处理的土壤中DCD半衰期分别比不灭菌处理的长13.56、5.79、14.51d。降解菌生长期间,降解菌总量（x）与DCD降解呈显著正相关,拟合的线性方程为y=3.1841x-2.5452,r=0.9752。外源DCD降解真菌可在灭菌土壤中定殖并有效降解DCD,培养15d后,U＋DCD＋DCD降解菌处理土壤中DCD降解真菌的数量增加至36.40×105cfu,且DCD含量极显著降低。这些结果表明土壤中DCD降解与降解菌关系极为密切,添加外源真菌加速了土壤中DCD降解。

... 罗涛等^[12]研究发现,添加外源真菌能加快双氰胺在土壤中降解的速度 ...

2014

0.0

... 虽然目前采用高效液相色谱法以及高效液相色谱-串联质谱法对牛奶^[13,14]、西药^[15,16,17]、食品^[18,19,20]、化肥^[21]甚至空气^[22]中双氰胺进行分析检测的研究已很多,但对于土壤样品中双氰胺残留量的准确测定鲜有涉及 ...

2014

0.0

胡雪, 李翠枝, 白艳梅, 段国霞, 赵静, 李慧秀. 超高效液相色谱质谱联用测定饲料、牛乳及乳制品中双氰胺[J]. 乳业科学与技术, 2014, 37(1): 19-22

建立超高效液相色谱质谱联用法检测饲料、牛乳及乳制品中双氰胺的方法。研究适用于检测饲料、牛乳及乳制品的前处理方法,并对色谱柱进行了选择。样品经乙腈提取、C18固相萃取填料净化后,低温冷冻离心除掉杂质,含0.1%甲酸的乙腈溶液和含0.1%甲酸的10 mmol/L甲酸铵水溶液梯度洗脱,通过Acquity BEH Amide色谱柱分离,电喷雾正离子多反应监测模式进行检测。结果表明:该方法在1~1 000μg/L范围内线性良好,相关系数r大于0.995,饲料定量限最高40μg/kg。不同添加质量浓度的回收率为80.5%~108.4%,相对标准偏差小于7.0%。该方法具有简单方便、检测周期短,适用于饲料、牛乳及乳制品检测等特点。

2009

0.0

马玉荣, 张茹, 秦莉伟. HPLC测定复方盐酸二甲双胍格列苯脲中3种有关物质[J]. 中国药事, 2009, 23(9): 911-913

目的建立HPLC方法测定复方盐酸二甲双胍格列苯脲片中已知有关物质双氰胺杂质(1)和杂质(2)的含量.方法采用VP-ODS 色谱柱,以甲醇-0.03mol·L-1磷酸二氢铵的0.025%十二烷基磺酸钠溶液(用磷酸调节pH值至3.5±0.05)(67∶33) 为流动相,流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃,检测波长双氰胺为215nm,杂质(1)和杂质(2)为300nm.结果双氰胺在0.125～1.25μg·mL-1范围内具有良好线性关系(r＝0.9998),平均回收率为100.6%(n=9),RSD=0.8%;杂质(1)和杂质(2)均在0.75～7.50μg·mL-1范围内具有良好线性关系,平均回收率均为99.9%(n=9),RSD=0.2%.结论本方法专属性强、操作简便、准确度高、重现性好.

2007

0.0

余延年. HPLC法测定盐酸二甲双胍肠溶微丸胶囊中双氰胺的含量[J]. 药物分析杂志, 2007, 27(4): 597-598

目的:建立HPLC法测定盐酸二甲双胍肠溶微丸胶囊中的有关物质(双氰胺)的含量方法。方法:色谱条件为:Inertsil-ODS-3(4.6mm×150mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%庚烷磺酸钠水溶液(16∶84),检测波长218nm,流速1mL·min~(-1)。结果:进样量在0.5～5ng时,与峰面积线性关系良好,r=0.9998(n=6)。平均回收率99.4%,精密度RSD=0.5%(n=6)。

2010

0.0

吴莉, 石蓓佳, 王玉. HPLC-MS/MS测定盐酸苯乙双胍及片剂中双氰胺的含量[J]. 中国药学杂志, 2010, 45(10): 780-783

OBJECTIVE To establish a HPLC-MS/MS method for the determination of dicyandiamide in phenformin hydrochloride and phenformin hydrochloride tablets. METHODS The separation was performed on an Agilent Eclipse XDB-C 18 column (4.6 mm×150 mm, 3.5 μm) with the mobile phase consisting of methanol-0.1% formic acid solution (30∶70), at a flow rate of 0.5 mL·min-1. Column temperature was 30 ℃. Atmospheric pressure chemical ionization (APCI) source was applied and operated in the positive ion mode in select reaction monitoring (SRM) mode. The fragmentation transitions from precursor to production were m/z 85→68 for dicyandiamide and m/z 152→134 for phenylpropanolamine hydrochloride respectively. RESULTS The calibration curve of dicyandiamide was linear in the range from 0.001 to 10.41 μg·mL-1 ( r =0.999 9). The mean recovery was 98.0% and the RSD was 1.8%. Intermediate precision of RSD was 5.3%. Repeatability of RSD was 1.9%. CONCLUSION This method is sensitive, specific, simple, rapid and accurate, and is suitable for the determination of dicyandiamide in phenformin hydrochloride and phenformin hydrochloride tablets.

目的建立高效液相色谱-质谱/质谱（HPLC-MS/MS）测定盐酸苯乙双胍及片剂中有关物质双氰胺含量的方法。方法色谱条件：采用Agilent Eclipse XDB-C 18 色谱柱(4.6 mm×150 mm，3.5 μm)，以甲醇-0.1%甲酸溶液(30∶70) 为流动相；流速：0.5 mL·min-1；柱温：30 ℃；质谱条件：采用大气压化学电离(APCI )源进行正离子检测，选择离子监测(SRM) 方式定量分析，双氰胺和内标盐酸苯丙醇胺的监测离子对分别为 m/z 85→68和 m/z 152→134。结果 HPLC-MS/MS测定盐酸苯乙双胍中双氰胺含量的线性范围为0.001～10.41 μg·mL-1 ( r =0.999 9)；加样回收率平均值达98.0%，RSD为1.8%；中间精密度的RSD为5.3%；重复性的RSD为1.9%。结论本法灵敏度高、专属性强、简便、快速、准确，适用于盐酸苯乙双胍及片剂中双氰胺的定量测定。

2014

0.0

2014

0.0

2012

0.0

王祖翔, 蒋俊, 孙莉, 周洪斌, 赵云霞. 高效液相色谱-串联质谱法测定食品中的尿素、缩二脲与双氰胺[J]. 分析测试学报, 2012, 31(5): 593-599

A high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometryic（HPLC-MS/MS） method was established for the simultaneous determination of urea,biruet and dicyandiamide in foods.Samples were soaked and mixed in water,then removed proteins by adding acetonitrile and frozen centrifuged to remove fat.The clear liquid was evaporated to dryness,and the residue was dissolved in 1 mL 70% ACN solution,and filtrated with membrane.The analytes were identified by HPLC-MS/MS with the positive electrospray ionization（ESI+） under multiple reaction monitoring（MRM） mode,and analyzed quantitatively by the external standard method.The calibration curves were linear in the concentration range of 0.1-20.0 mg/L for three compounds with correlation coefficients（r2） more than 0.995.The limits of detection（LODs） of urea,biruet and dicyandiamide were 0.03,0.05,0.01 mg/L,respectively,and their limits of quantitation（LOQs） were 0.08,0.10,0.03 mg/L,respectively.The average recoveries for urea,biruet and dicyandiamide at spiked concentration levels of 5.0,10.0,20.0 mg/kg were in the range of 70%-99% with relative standard derivations（RSDs） of 0.42%-8.0%.The method was simple,sensitive and accurate,and was suitable for the determination of urea,biruet and dicyandiamide residue in food samples.

建立了高效液相色谱-串联质谱法同时检测食品中尿素、缩二脲和双氰胺的方法。样品经水浸泡并混匀，加入乙腈沉淀蛋白，通过冷冻离心去除脂肪，取清液挥干后用1.0 mL 70%乙腈水溶液复溶、过膜。采用电喷雾负离子电离（ESI+）模式和多反应监控（MRM）扫描模式，外标法定量。该方法在0.1~20.0 mg/L范围内线性关系良好，相关系数（r2）大于0.995。尿素、缩二脲和双氰胺的检出限分别为0.03、0.05、0.01 mg/L，定量下限分别为0.08、0.10、0.03 mg/L。加标水平为5.0、10.0、20.0 mg/kg时，尿素、缩二脲和双氰胺的平均回收率为70%~99%，相对标准偏差为0.42%~8.0%。该方法简便、灵敏、精确，适用于食品中尿素、缩二脲和双氰胺的检测。

2014

0.0

程莎, 李建兵, 王晖, 丁明善, 王志存. 高效液相法测定化肥中的双氰胺和三聚氰胺的方法研究[J]. 现代化工, 2014, (3): 166-168

摘　要：利用高效液相色谱对化肥中双氰胺和三聚氰胺的检测方法进行了研究.通过对色谱条件的优化,最后确立了有效的检测方法.采用V（0.01 mol/L乙酸铵）∶V（乙腈）=95∶5作为流动相,205 nm为检测波长.双氰胺和三聚氰胺标准溶液在1～80 μg/mL之间均具有良好的线性关系,最低定量限分别为0.5μg/mL和1.0 μg/mL,回收率为95.3％～ 100.4％.此法处理样品简便易行,分析速度快,具有良好的重复性和再现性,适于测定化肥中的双氰胺和三聚氰胺.

2009

0.0

周长美, 周靖平, 吴健, 李小娟. 高效液相色谱测定工作场所空气中双氰胺方法的验证[J]. 江苏预防医学, 2009, 20(3): 63-64

研究出用高效液相色谱法测定工作场所空气中的双氰胺.为了考核该法的可靠性、准确性和适应性,进行了系统验证实验.

2013

0.0

陈小珍, 陈万勤, 王瑾, 黄丽英, 张东雷. 高效液相色谱法测定乳制品中的双氰胺[J]. 色谱, 2013, 31(9): 875-877

A high performance liquid chromatographic (HPLC) method for the determination of dicyandiamide in dairy products was developed. The sample was extracted by acetonitrile, separated on an XBridge Amide column (250 mm×4.6 mm, 3.5 μm) using acetonitrile-water (90/10, v/v) containing 0.2%(v/v) formic acid as the mobile phase at a flow rate of 1.0 mL/min, and determined by a photodiode array detector at the wavelength of 218 nm. The calibration curve was linear in the range of 0.5-50 mg/L with the correlation coefficient ( r 2 ) of 0.9999. The recoveries were from 96.7% to 101.0% with the relative standard deviations (RSDs) in the range of 4.5% to 4.9%( n =6). The limit of detection was 0.2 mg/kg, and the limit of quantification was 0.5 mg/kg. The method is simple, sensitive, accurate and precise for the determination of dicyandiamide in dairy products.

建立了乳制品中双氰胺的高效液相色谱(HPLC)检测方法。样品经乙腈提取后采用HPLC测定。优化后的色谱条件:XBridge Amide柱(250 mm×4.6 mm, 3.5 μm),流动相为乙腈和水(体积比为90:10,含0.2%甲酸),流速为1.0 mL/min,检测波长为218 nm。方法在0.5~50 mg/L范围内线性关系良好,相关系数( r 2 )为0.9999,回收率在96.7%~101.0%之间,RSD为4.5%~4.9%( n =6),检出限为0.2 mg/kg( S/N =3),定量限为0.5 mg/kg( S/N =10)。该方法简单、准确、灵敏度高,适用于各种乳制品中双氰胺的检测。

... 有研究表明,检测乳制品中的双氰胺时,在与本研究类似的前处理条件下,采用双氰胺-¹⁵N₄作为内标物能获得较低的检出限及较高的回收率^{[23,24,25,26]},本试验结果也印证了这一点 ...

2013

0.0

黄芳, 马叶芬, 吴惠勤, 黄晓兰, 邓欣, 罗辉泰, 朱志鑫, 林晓珊. 液相色谱-串联质谱法快速测定奶粉中的双氰胺[J]. 分析测试学报, 2013, 32(3): 271-274

A method was developed for the determination of dicyandiamide in infant milk powder by high-performance liquid chromatography-mass spectrometry（LC-MS/MS）.The conditions of extraction and parameters of LC-MS were optimized.The sample was extracted with water,precipitated with acetonitrile,then separated on a Thermo syncronis column using mixture of acetonitrile（containing 0.2% formic acid）-0.1% formic acid（containing 10 mmol/L ammonium formate）（95∶5） as mobile phase at a flow rate of 0.3 mL/min.The detection of dicyandiamide was performed by positive-ion electrospray ionization mass spectrometry（ESI-MS） utilizing multiple reaction monitoring of two parent-daughter ion pairs:m/z 85/68 and 85/43.A good linear relationship was obtained in the range of 0.2-100 μg/L,with a correlation coefficient of 0.999 8.The spiked recoveries at different spiked levels were in the range of 79%-83%.The detection limit of dicyandiamide was 0.1 μg/L,and the quantitatiion limit of method was 5 μg/kg.The results indicated that the method was rapid,selective,sensitive and stable enough to examine dicyandiamide in infant milk powder.

建立了奶粉中双氰胺的高效液相色谱-串联质谱快速测定方法。实验优化了前处理条件、液相色谱条件和质谱参数。样品经水提取，乙腈分次沉淀蛋白后，采用亲水高效液相色谱柱分离，流动相为乙腈（含0.2%甲酸）-0.1%甲酸（含10 mmol/L甲酸铵）（体积比95∶5），流速0.3 mL/min。采用正离子模式的电喷雾质谱检测，多反应（MRM）选择离子监测,检测离子对为m/z 85→68和m/z 85→43，检测周期为5 min。结果显示，双氰胺在0.2~100 μg/L范围内线性良好，相关系数为0.999 8。双氰胺的检出限为0.1 μg/L，方法的定量下限为5 μg/kg。低、中、高3个加标水平下的平均回收率为79%~83%，相对标准偏差为2.7%~6.5%。方法简便快速、准确可靠，已用于奶粉中双氰胺的检测。

2013

0.0

冯峰, 蒋萍萍, 李娜思, 周洪斌, 储晓刚. 超高效液相色谱-质谱法测定乳粉中的双氰胺[J]. 分析化学, 2013, 41(11): 1729-1733

Dicyandiamide, as a new contaminant in milk powders, can lead to harmful effects to human health, especially to infants and young children. A rapid and accurate method for the determination of dicyandiamide in milk powders using ultra performance liquid chromatography-electrospray ionization-tandem mass spectrometry (UPLC-ESI-MS/MS) was established. The milk powders samples were extracted by acetonitrile which contained 2% NH4OH solution (V/V), the separation was carried out using an UPLC BEH HILIC(150 mm x 2.1 mm, 1.7 mu m) column, 10 mmol/L ammonium formate/formic acid buffer (pH 4.0) and acetonitrile as the mobile phases, gradient elution. The dicyandiamide was detected by ESI+ under selected ion monitoring mode. The quantified concentration range was 5 200 mu g/L using matrix-matched calibration curves. When applying this method to determine real milk powder samples, the detection limits was 10 mu g/kg. The recoveries were 83.7%, 89.1% and 96.7% respectively when spiked negative samples with 50, 100 and 200 mu g/kg dicyandiamide, and the relative standard deviations were less than 2%. This method is rapid, accurate, highly sensitive and suitable for the determination of dicyandiamide in milk powders.

Feng Feng 1 ;Jiang Ping-Ping 1 ;Chu Xiao-Gang 1 ;Li Na-Si 2 ;Zhou Hong-Bin 3 ;

2014

0.0

2014

0.0

黄秀声, 钟珍梅, 黄勤楼, 冯德庆, 陈钟佃, 王明光. 利用¹⁵N示踪技术研究8种禾本科牧草对氮肥的吸收和转化效率[J]. 核农学报, 2014, 28(9): 1677-1684

摘　要：研究牧草对肥料氮素的吸收及动物转化效率所表现的基因型差异,对指导优良牧草品种的筛选具有重要意义。本研究采用15N同位素示踪方法,通过盆栽试验测定了杂交狼尾草、热研3号俯仰臂形草、热研8号坚尼草、热研11号黑籽雀稗、墨西哥玉米、苏丹草、黑麦草、高羊茅8种禾本科牧草对氮肥的利用效率,并利用15N标记牧草饲喂小白鼠,测定动物对牧草的消化吸收率。结果表明：8种牧草15N肥料利用率为5.197%~29.340%,其中以杂交狼尾草的氮肥利用效率最高;小白鼠对15N标记牧草的消化率为27.67%~68.20%,消化率依次为黑麦草〉苏丹草〉墨西哥玉米〉杂交狼尾草〉俯仰臂形草〉坚尼草〉高羊茅〉黑籽雀稗;鼠体对牧草15N的回收率为22.62%~43.90%,表明牧草对氮肥的吸收与转化效率存在明显的基因型差异。综合评价认为,6种夏季牧草品种中,以杂交狼尾草和热研3号俯仰臂形草的15N转化效果较好,冬季牧草品种黑麦草则优于高羊茅。

... 在施肥途径及肥效研究中,同位素示踪技术已经起到了举足轻重的作用^[27] ...

2014

0.0

杨征敏, 吕龙, 叶庆富. 五种嘧啶苄胺类除草剂氘取代物的合成[J]. 核农学报, 2014, 28(11): 2086-2092

In order to prepare isotope internal standards in quantitation of the residues of five novel herbicides, the methoxyl-deuterated forms of five ingredients were synthesized from ( 2 H 4 )methanol in six steps via nucleophilic substitution, oxidation, condensation, and reduction reactions, respectively. The deuterium substituted compounds are isopropyl 4-(2-chloro-6-(4,6-di( 2 H 3 )methoxypyrimidin-2-yloxy)benzylamino)benzoate, propyl 4-(2-chloro-6-(4,6-di( 2 H 3 )methoxypyrimidin-2-yloxy)benzylamino)benzoate, 5-bromo-N-(2-chloro-6-(4,6-di( 2 H 3 )methoxypyrimidin-2-yloxy)benzyl)pyridin-2-amine, 4-bromo-N-(2-chloro-6-(4,6-di( 2 H 3 )methoxypyrimidin-2-yloxy)benzyl)aniline, and 2,5-dichloro-N-(2-chloro-6-(4,6-di( 2 H 3 )methoxypyrimidin-2-yloxy)benzyl)aniline. Their structures were elucidated by NMR, MS, FTIR, and UV, and their chemical purities are all great than 98%, determined by HPLC. These deuterium substituted compounds could be used as isotope internal standards in quantitation of herbicide residue in agricultural products and its downstream foodstuff by HPLC-MS/MS.

为制备HPLC-MS/MS农药残留分析中使用的新发现除草活性成分的同位素内标物,本研究以全氘代甲醇为起始原料,通过亲核取代、氧化、缩合、还原等6步反应制备了5种活性成分的甲氧基的全氘代物,分别是4-[2-氯-6-(4,6-二( 2 H 3 )甲氧基-2-嘧啶氧基)苄氨基]苯甲酸异丙酯、4-[2-氯-6-(4,6-二( 2 H 3 )甲氧基-2-嘧啶氧基)苄胺基]苯甲酸正丙酯、 N -[2-氯-6-(4,6-二( 2 H 3 )甲氧基-2-嘧啶氧基)苄氨基]-5-溴吡啶、 N -[2-氯-6-(4,6-二( 2 H 3 )甲氧基-2-嘧啶氧基)苄基]-4-溴苯胺和 N -[2-氯-6-(4,6-二( 2 H 3 )甲氧基-2-嘧啶氧基)苄基]-2,5-二氯苯胺.氘取代物结构通过NMR、MS、FTIR和UV确证.HPLC外标法分析表明,5种氘取代物的化学纯度均大于98%.这些甲氧基氘取代物完全满足质谱分析对内标物的要求,可作为HPLC-MS/MS分析的同位素内标物.

... 同位素内标法在定量分析方面的优势也使稳定同位素标记物有很广阔的市场前景,但关于其制备技术的研究在国内尚处于起步阶段,而当前市售的同位素内标试剂仍多为进口商品,价格昂贵^[28] ...